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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

產(chǎn)品簡介:

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品:G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白2抗體 EMB蛋白抗體 腦瘤相關(guān)基因抗體 大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞 小鼠心臟微血管周細(xì)胞 E14小鼠胚胎干細(xì)胞 KTC-1 (人甲狀腺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:614

更新時間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

骨髓

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

YS-01X8101

細(xì)胞簡介:

大鼠骨髓樹突狀分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,在GM-CSFIL4的作用下形成葡萄串樣集落,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強(qiáng)的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細(xì)胞呈圓形,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的信號,可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

實驗室分離的大鼠骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

傳代特性:屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)


公司正在出售的產(chǎn)品:

質(zhì)粒小量提取試劑盒   Plasmid Exaction Kit

高度質(zhì)粒小量提取試劑盒   High purity Plasmid Exaction Kit

質(zhì)粒中量提取試劑盒   Plasmid Exaction Kit

高度質(zhì)粒中量提取試劑盒   High purity plasmid exact Kit

豬α葡萄糖苷酶(α-Glu)試劑盒

Human ai ierferon alpha (IFN alpha -Ab) aibody ELISA Kit 人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)試劑盒

Porcineierleukin4,IL-4ELISAKit 豬白介素4(IL-4)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAhCGAb(Humanai-chorionicgonadoopin-aibody)ELISAKit人抗染色體抗體

血液牛病毒性腹瀉病毒II(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定性試劑盒20

MouseTumornecrosisfactorsolublereceptor,TNFsR-ELISAKit小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-)試劑盒

AF680標(biāo)記的骨橋蛋白抗體

耳聾常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白1抗體

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mgMTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC 致癌基因(抗原)

SIRT1重組人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AHSP Protein Human 重組人 AHSP / ERAF 蛋白

SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mgMTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC 致癌基因(抗原)

AHSP Protein Human 重組人 AHSP / ERAF 蛋白

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SIRT1重組人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒

Rat ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒

Humahioredoxieductase,xRELISAKit 人硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASP試劑盒人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)試劑盒

植物*酶(CATALASE)過氧化活性比色法定量試劑盒20

Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)試劑盒


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