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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠外周血單個核細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

小鼠外周血單個核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:肌管素相關(guān)蛋白2抗體 鋅指蛋白750抗體 等上游刺激因子1抗體 小鼠下頜骨成纖維細(xì)胞 大鼠肌腱干細(xì)胞 Beta-TC-6小鼠胰島素瘤胰島Beta細(xì)胞 人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞;MKN-28-luc-EGFP

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:1370

更新時間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠外周血單個核細(xì)胞

小鼠外周血單個核細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

外周血

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形

YS-01X7573

細(xì)胞簡介:

小鼠外周血單個核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細(xì)胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細(xì)胞。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠外周血單個核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠外周血單個核經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠外周血單個核細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠外周血單個核細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

血管內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender

血管內(nèi)皮生長因子 C(VEGF-C)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender

血管內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

血管內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble Endoglin (ENG/sCD105) ELISA Kit 人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒

Humanα-Synuclein,α-SYNELISAKit 人α突觸核蛋白(α-SYN)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor6-K-PG(Human6-keto-prostaglandin)ELISAKit6同前列腺素

飲類異檸檬酸比色法定量試劑盒20

Mousemaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

補(bǔ)體C3b抗體

SAPS結(jié)構(gòu)域家族3抗體

HA重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

rHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原 100ugrHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原

ICOS重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白

HGFA Protein Human 重組人 HGFA 蛋白

rHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原 100ugrHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原

CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白

HA重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

HGFA Protein Human 重組人 HGFA 蛋白

ICOS重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠外周血單個核細(xì)胞大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒 ,英文名: βAPP ELISA Kit

Porcine myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 豬髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒

馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLTA(HumanlymphotoxinAlpha,LTA)ELISAKit人淋巴毒素α

通用961

ELISAKitIrna雞免疫核糖核酸


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